செல் கலாச்சாரங்களை மாசுபடுத்துவது செல் கலாச்சார ஆய்வகங்களில் மிகவும் பொதுவான பிரச்சனையாக மாறும், சில சமயங்களில் மிகவும் கடுமையான விளைவுகளை ஏற்படுத்தும்.செல் கலாச்சார அசுத்தங்களை இரண்டு வகைகளாகப் பிரிக்கலாம், நடுத்தர, சீரம் மற்றும் நீர் அசுத்தங்கள், எண்டோடாக்சின்கள், பிளாஸ்டிசைசர்கள் மற்றும் சவர்க்காரம் போன்ற இரசாயன அசுத்தங்கள் மற்றும் பாக்டீரியா, அச்சுகள், ஈஸ்ட்கள், வைரஸ்கள், மைக்கோபிளாஸ்மாக்கள் குறுக்கு தொற்று போன்ற உயிரியல் அசுத்தங்கள்.மற்ற செல் கோடுகளால் மாசுபட்டது.மாசுபாட்டை முற்றிலுமாக அகற்றுவது சாத்தியமில்லை என்றாலும், அதன் மூலத்தை நன்கு புரிந்துகொள்வதன் மூலமும், நல்ல அசெப்டிக் நுட்பங்களைப் பின்பற்றுவதன் மூலமும் அதன் அதிர்வெண் மற்றும் தீவிரத்தன்மையைக் குறைக்கலாம்.
1.இந்தப் பிரிவு உயிரியல் மாசுபாட்டின் முக்கிய வகைகளைக் கோடிட்டுக் காட்டுகிறது:
பாக்டீரியா மாசுபாடு
அச்சு மற்றும் வைரஸ் மாசுபாடு
மைக்கோபிளாஸ்மா மாசுபாடு
ஈஸ்ட் மாசுபாடு
1.1 பாக்டீரியா மாசுபாடு
பாக்டீரியா என்பது எங்கும் நிறைந்த ஒற்றை செல் நுண்ணுயிரிகளின் ஒரு பெரிய குழுவாகும்.அவை வழக்கமாக ஒரு சில மைக்ரான் விட்டம் கொண்டவை மற்றும் கோளங்கள் முதல் தண்டுகள் மற்றும் சுருள்கள் வரை பல்வேறு வடிவங்களில் வரலாம்.அவற்றின் எங்கும் நிறைந்து, அளவு மற்றும் விரைவான வளர்ச்சி விகிதம் காரணமாக, பாக்டீரியா, ஈஸ்ட்கள் மற்றும் அச்சுகளுடன், செல் கலாச்சாரத்தில் மிகவும் பொதுவான உயிரியல் அசுத்தங்கள் ஆகும்.
1.1.1 பாக்டீரியா மாசுபாட்டைக் கண்டறிதல்
பாக்டீரியல் மாசுபாடு, தொற்று ஏற்பட்ட சில நாட்களுக்குள் கலாச்சாரத்தின் காட்சி ஆய்வு மூலம் எளிதில் கண்டறியப்படுகிறது;
பாதிக்கப்பட்ட பண்பாடுகள் பொதுவாக மேகமூட்டத்துடன் (அதாவது கொந்தளிப்புடன்), சில சமயங்களில் மேற்பரப்பில் மெல்லிய படலத்துடன் காணப்படும்.
கலாச்சார ஊடகத்தின் pH இல் திடீர் வீழ்ச்சியும் அடிக்கடி சந்திக்கப்படுகிறது.
குறைந்த சக்தி நுண்ணோக்கின் கீழ், பாக்டீரியாக்கள் சிறிய, செல்களுக்கு இடையில் நகரும் துகள்களாகத் தோன்றும், மேலும் உயர் சக்தி நுண்ணோக்கியின் கீழ் கவனிப்பதன் மூலம் தனிப்பட்ட பாக்டீரியாக்களின் வடிவங்களைத் தீர்க்க முடியும்.
1.2 பூஞ்சை மற்றும் வைரஸ் மாசுபாடு
1.2.1 அச்சு மாசுபாடு
அச்சுகள் என்பது பூஞ்சை இராச்சியத்தின் யூகாரியோடிக் நுண்ணுயிரிகளாகும், அவை ஹைஃபே எனப்படும் பலசெல்லுலர் இழைகளின் வடிவத்தில் வளரும்.இந்த மல்டிசெல்லுலர் இழைகளின் இணைப்பு நெட்வொர்க்குகள் காலனிகள் அல்லது மைசீலியம் எனப்படும் மரபணு ரீதியாக ஒரே மாதிரியான கருக்களைக் கொண்டுள்ளன.
ஈஸ்ட் மாசுபாட்டைப் போலவே, மாசுபாட்டின் ஆரம்ப கட்டத்தில் கலாச்சாரத்தின் pH நிலையாக இருக்கும், பின்னர் கலாச்சாரம் மிகவும் கடுமையாக பாதிக்கப்பட்டு மேகமூட்டமாக மாறும் போது வேகமாக அதிகரிக்கிறது.நுண்ணோக்கின் கீழ், மைசீலியம் பொதுவாக இழைகளாகவும், சில சமயங்களில் வித்திகளின் அடர்த்தியான கொத்துகளாகவும் இருக்கும்.பல அச்சுகளின் வித்திகள் அவற்றின் செயலற்ற கட்டத்தில் மிகவும் கடுமையான மற்றும் விருந்தோம்பல் சூழலில் உயிர்வாழ முடியும் மற்றும் சரியான வளர்ச்சி நிலைமைகளை எதிர்கொள்ளும் போது மட்டுமே செயல்படுத்தப்படும்.
1.2.2 வைரஸ் மாசுபாடு
வைரஸ்கள் நுண்ணிய தொற்று முகவர்கள் ஆகும், அவை இனப்பெருக்கம் செய்ய ஹோஸ்ட் செல் இயந்திரங்களை எடுத்துக் கொள்கின்றன.அவற்றின் மிகச் சிறிய அளவு, கலாச்சாரத்தில் அவற்றைக் கண்டறிவதை கடினமாக்குகிறது மற்றும் செல் கலாச்சார ஆய்வகங்களில் பயன்படுத்தப்படும் உலைகளில் இருந்து நீக்குகிறது.பெரும்பாலான வைரஸ்கள் அவற்றின் புரவலர்களுக்கு மிகவும் கடுமையான தேவைகளைக் கொண்டிருப்பதால், அவை பொதுவாக புரவலன் தவிர மற்ற உயிரினங்களின் செல் கலாச்சாரங்களை மோசமாக பாதிக்காது.
இருப்பினும், வைரஸ்-பாதிக்கப்பட்ட செல் கலாச்சாரங்களைப் பயன்படுத்துவது ஆய்வக பணியாளர்களின் ஆரோக்கியத்திற்கு கடுமையான ஆபத்தை ஏற்படுத்தும், குறிப்பாக மனித அல்லது விலங்கு உயிரணுக்கள் ஆய்வகத்தில் வளர்க்கப்பட்டால்.
செல் கலாச்சாரங்களில் உள்ள வைரஸ் தொற்று எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கி மூலம் கண்டறியப்படலாம், ஆன்டிபாடிகளின் தொகுப்புடன் இம்யூனோஸ்டைனிங், ELISA அல்லது PCR பொருத்தமான வைரஸ் ப்ரைமர்கள்.
1.3 மைக்கோபிளாஸ்மா மாசுபாடு
மைக்கோபிளாஸ்மாக்கள் செல் சுவர்கள் இல்லாத எளிய பாக்டீரியாக்கள், மேலும் அவை மிகச்சிறிய சுய-பிரதி உயிரினங்கள் என்று கருதப்படுகிறது.அவற்றின் மிகச்சிறிய அளவு (பொதுவாக 1 மைக்ரானுக்கும் குறைவாக) இருப்பதால், மைக்கோபிளாஸ்மா மிக அதிக அடர்த்தியை அடையும் வரை கண்டறிவது கடினம் மற்றும் செல் கலாச்சாரங்கள் மோசமடையும்;அதுவரை, பொதுவாக நோய்த்தொற்றின் வெளிப்படையான அறிகுறிகள் எதுவும் இல்லை.
1.3.1 மைக்கோபிளாஸ்மா மாசுபாட்டைக் கண்டறிதல்
சில மெதுவாக வளரும் மைக்கோபிளாஸ்மாக்கள் உயிரணு இறப்பை ஏற்படுத்தாமல் கலாச்சாரங்களில் நிலைத்திருக்கலாம், ஆனால் அவை கலாச்சாரங்களில் ஹோஸ்ட் செல்களின் நடத்தை மற்றும் வளர்சிதை மாற்றத்தை மாற்றுகின்றன.
நாள்பட்ட மைக்கோப்ளாஸ்மா நோய்த்தொற்றானது செல் பெருக்கம் குறைதல், செறிவூட்டல் அடர்த்தி குறைதல் மற்றும் இடைநீக்க கலாச்சாரத்தில் திரட்டுதல் ஆகியவற்றால் வகைப்படுத்தப்படலாம்.
இருப்பினும், மைக்கோபிளாஸ்மா மாசுபாட்டைக் கண்டறிவதற்கான ஒரே நம்பகமான வழி, ஃப்ளோரசன்ட் ஸ்டைனிங் (எ.கா., ஹோச்ஸ்ட் 33258), ELISA, PCR, இம்யூனோஸ்டைனிங், ஆட்டோரேடியோகிராபி அல்லது நுண்ணுயிர் சோதனை ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி கலாச்சாரத்தை தொடர்ந்து சோதிப்பதாகும்.
1.4 ஈஸ்ட் மாசுபாடு
ஈஸ்ட்கள் பூஞ்சை இராச்சியத்தின் ஒற்றை செல் யூகாரியோட்டுகள், சில மைக்ரான்கள் (பொதுவாக) முதல் 40 மைக்ரான்கள் (அரிதாக) வரை இருக்கும்.
1.4.1 ஈஸ்ட் மாசுபாட்டைக் கண்டறிதல்
பாக்டீரியா மாசுபாட்டைப் போலவே, ஈஸ்டால் மாசுபடுத்தப்பட்ட கலாச்சாரங்களும் மேகமூட்டமாக மாறும், குறிப்பாக மாசுபாடு மேம்பட்ட நிலையில் இருந்தால்.ஈஸ்ட் மூலம் மாசுபடுத்தப்பட்ட கலாச்சாரங்களின் pH மாசுபாடு மிகவும் தீவிரமடையும் வரை மிகக் குறைவாகவே மாறுகிறது, அந்த கட்டத்தில் pH பொதுவாக அதிகரிக்கிறது.நுண்ணோக்கின் கீழ், ஈஸ்ட் தனிப்பட்ட முட்டை அல்லது கோளத் துகள்களாகத் தோன்றும் மற்றும் சிறிய துகள்களை உருவாக்கலாம்.
2.குறுக்கு தொற்று
நுண்ணுயிர் மாசுபாடு போல பொதுவானதாக இல்லாவிட்டாலும், ஹெலா மற்றும் பிற வேகமாக வளரும் செல் கோடுகளுடன் பல செல் கோடுகளின் விரிவான குறுக்கு-மாசுபாடு கடுமையான விளைவுகளுடன் தெளிவாக வரையறுக்கப்பட்ட பிரச்சனையாகும்.புகழ்பெற்ற செல் வங்கிகளில் இருந்து செல் லைன்களைப் பெறவும், செல் கோடுகளின் பண்புகளை தவறாமல் சரிபார்க்கவும் மற்றும் நல்ல அசெப்டிக் நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தவும்.இந்த நடைமுறைகள் குறுக்கு மாசுபாட்டைத் தவிர்க்க உதவும்.டிஎன்ஏ கைரேகை, காரியோடைப் மற்றும் ஐசோடைப்பிங் ஆகியவை உங்கள் செல் கலாச்சாரத்தில் குறுக்கு-மாசு உள்ளதா என்பதை உறுதிப்படுத்த முடியும்.
நுண்ணுயிர் மாசுபாடு போல பொதுவானதாக இல்லாவிட்டாலும், ஹெலா மற்றும் பிற வேகமாக வளரும் செல் கோடுகளுடன் பல செல் கோடுகளின் விரிவான குறுக்கு-மாசுபாடு கடுமையான விளைவுகளுடன் தெளிவாக வரையறுக்கப்பட்ட பிரச்சனையாகும்.புகழ்பெற்ற செல் வங்கிகளில் இருந்து செல் லைன்களைப் பெறவும், செல் கோடுகளின் பண்புகளை தவறாமல் சரிபார்க்கவும் மற்றும் நல்ல அசெப்டிக் நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தவும்.இந்த நடைமுறைகள் குறுக்கு மாசுபாட்டைத் தவிர்க்க உதவும்.டிஎன்ஏ கைரேகை, காரியோடைப் மற்றும் ஐசோடைப்பிங் ஆகியவை உங்கள் செல் கலாச்சாரத்தில் குறுக்கு-மாசு உள்ளதா என்பதை உறுதிப்படுத்த முடியும்.
இடுகை நேரம்: பிப்ரவரி-01-2023